霉酚酸酯和环孢霉素A对体外培养人结膜杯状细胞及其分泌功能的调控

霉酚酸酯和环孢霉素A对体外培养人结膜杯状细胞

及其分泌功能的调控 

中山大学中山眼科中心·眼科学国家重点实验室

钟兴武 何宏

目的 通过体外实验，探讨霉酚酸酯（MMF）和环孢霉素A（CsA）对体外培养人结膜杯状细胞及其MUCIN5AC分泌功能的影响；从分子水平阐述两种药物对干眼起治疗作用的可能机制。

方法 不同浓度的MMF和CsA分别与体外培养的高纯度人结膜杯状细胞共培养。24小时后，Cell Count Kit-8（CCK-8）测定细胞增殖；巢式Taqman PCR（QNRT-PCR）测定细胞内MUCIN5ACmRNA表达水平。

结果 （1）MMF双向调控人结膜杯状细胞增殖（P<0.05），剂量依赖性上调MUCIN5ACmRNA表达（P<0.05）。MMF对细胞增殖功能的双向调控表现为：与对照组（0加药组）相比，0.25-1ng/ml组显著促进细胞增殖；2.5-10ng/ml组，对细胞数量无明显影响；25-100ng/ml组显著抑制细胞增殖。（2）CsA对结膜杯状细胞的增殖无明显影响（P>0.05），但双向调控MUCIN5ACmRNA表达(P<0.05): 与对照组（0加药组）比较，25ng/ml组显著下调MUCIN5ACmRNA表达；0.25ng/ml、2.5ng/ml组表现出显著上调作用。（3）0.25ng/ml是MMF和CsA正向调控杯状细胞及MUCIN5AC分泌功能的最低有效浓度。(4) 0.25ng/ml-2.5ng/mlCsA和MMF均可在不表现细胞毒性的前提下，正向调控MUCIN5ACmRNA表达；与相同浓度CsA比较，0.25ng/ml、0.5ng/ml组MMF对杯状细胞的增殖和MUCIN5AC分泌均表现出更显著的正向调控能力(P<0.05)。

结论 （1）MMF双向调控体外培养结膜杯状细胞增殖，上调MUCIN5ACmRNA表达。

（2）CsA对体外培养结膜杯状细胞增殖无明显影响，可双向调控MUCIN5ACmRNA表达。

（3）低浓度MMF和CsA更有利于促进体外培养结膜杯状细胞及其分泌功能，在干眼治疗中具有较广阔的应用前景。